[摘要]
【摘要】目的 探究GluK2受体小泛素化修饰蛋白(SUMO)2/3化在猪模型深低温停循环(DHCA)脑损伤中的作用机制。方法 将18只中华小型猪随机分为体外循环组(CPB组)、DHCA组和选择性脑灌注(SACP)组,每组6只。建立猪DHCA和SACP模型,术后2 h处死猪留取海马区脑组织标本。蛋白质印迹法检测海马区脑组织中SUMO2/3化水平、GluK2、p-MLK3、MLK3、p-JNK3、JNK3表达;免疫共沉淀检测GluK2 SUMO2/3化的程度以及GluK2和MLK3蛋白之间的相互作用。TUNEL法检测海马区脑组织凋亡情况;免疫组织化学染色检测Bax、Bcl-2和Caspase-3表达。结果 DHCA组海马区脑组织中SUMO2/3和GluK2表达[(1.438±0.011)、(1.965±0.107)]较SACP组[(1.220±0.039)、(1.372±0.196),均P<0.05]和CPB组[(0.443±0.025)、(0.986±0.181),均P<0.01]明显增加。DHCA组海马区脑组织中GluK2-SUMO2/3和GluK2-MLK3表达较其他2组明显增加(均P<0.01)。DHCA组p-MLK3/MLK3和p-JNK3/JNK3表达较其他2组明显增加(均P<0.05)。TUNEL检测发现DHCA组海马区神经元凋亡最明显,凋亡率为64.8%,较CPB组(15.8%)和SACP组(47.0%)明显增加(均P<0.001)。免疫组织化学结果显示DHCA组海马区脑组织中Bax和Caspase-3表达较CPB组和SACP组明显增加,而Bcl-2表达较其他2组明显减少。结论 DHCA脑损伤时可能通过激活GluK2受体发生SUMO2/3化,增加GluK2受体和下游MLK3蛋白的相互作用,激活MLK3发生磷酸化,进一步激活下游的JNK3启动凋亡信号。